sop氟康唑检验操作规程
| |颁发部门 | | |氟康唑检验操作规程 |接收部门 | | | |生效日期 | | |操作标准---质量 |制定人 | |制定日期 | | |文件编号| |审核人 | |审核日期 | | |文件页数|共8页 |批准人 | |批准日期 | | |分发部门|质监科、化验室 | 1 目的 确定进厂氟康唑原料检验的操作程序和方法，确保合格的氟康唑原料投入生产。 2 范围 适用于本厂质监科化验室对进厂的氟康唑原料的检验。 3 责任 检验员有责任按照本操作规程进行检验、判定，并对检验结果负责。 4 内容 4.1仪器 分光光度计、熔点测定仪、红外分光光度计、高效液相色谱仪、马弗炉、坩埚、微量 进样器、容量瓶、精密天平、移液管、滴定管、参比电极、指示电极、电磁搅拌器，PH 计（电位滴定仪）、石英燃烧瓶等。 4.2性状 4.2.1本品为白色或类白色结晶或结晶性粉末，无臭或微带特异臭，味苦。 本品在甲醇中易溶，在乙醇中溶解，在二氯甲烷、水或冰醋酸中微溶，在乙醚中不溶。 4.2.2熔点测定 按药物熔点仪操作规程测定。熔点应为138～140℃（供注射用）；或137～141℃（供口 服用）。 4.3鉴别 4.3.1精密称取本品约10mg，置50ml容量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，用紫外分光光 度计测定，在261±2nm与267±2nm的波长处有最大吸收，在264±2nm的波长处有最小吸收。 第2页/共8页 4.3.2红外图谱 4.3.2.1溴化钾片制备 取200目干燥的溴化钾粉末200mg，加供试品1- 2mg，在玛瑙乳钵中研匀（操作在红外灯下进行），装入压片模具，边抽边加压至规定压 力（通常为8t）并维持压力约为10min，卸掉压力，则得厚度约为1mm的透明的溴化钾片 ，即可测定。所用溴化钾如无光谱纯品，可用分析级试剂，若无明显吸收，不经精制干 燥后直接用。 4.3.2.2使用时应按仪器说明书进行操作，在4000-400cm-1（取波长2.5- 25μm）的红外光区测定其吸收图谱，所得的吸收图谱各主要吸收峰的波数和各吸收峰间 的相互强度关系均应与对照品的图谱一致。 4.3.2.3测定时应尽量调节好供试品的厚度和浓度，使最高吸收峰的透过率在1- 5%，基线在90-95%，可在参比光路上使用补偿器，用空白溴化钾片补偿。 4.3.3有机氟化物的鉴别反应 4.3.3.1试剂及配制 a.茜素氟蓝试液 取茜素氟蓝0.19g，加氢氧化钠溶液(1.2→100)12.5ml，加水800ml与醋酸钠结晶0.25g， 用稀盐酸调节PH值约为5.4，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。 b.稀醋酸 取冰醋酸60ml，加水稀释至1000ml，摇匀，即得。 c.12%醋酸钠的稀酸溶液 取醋酸钠12g，加稀醋酸适量溶解并稀释到1000ml，摇匀，即得。 d.硝酸亚铈试液 取硝酸亚铈0.22g，加水50ml使溶解，加硝酸0.1ml与盐酸羟胺50mg，用水稀释至100 0ml，摇匀，即得。 e.0.01mol/L氢氧化钠液 取0.1mol/L氢氧化钠液10ml，加水稀释成100ml，摇匀，即得。 4.3.3.2检验操作 A.供试品制备：取本品约7mg，研细，置无灰滤纸中心，按药典规定的方法进行折叠后， 固定于铂丝下端内或螺旋处，使尾部露出，在燃烧瓶内加入20ml水与0.01mol/L氢氧化钠 溶液6.5ml，为吸收液，并将瓶颈用水湿润，小心急速通入氧气约1分钟（通气管应接近 液面，使瓶内空气排尽），立即用表面皿覆盖瓶口，移置他处，点燃包有供试品的滤纸 尾部，迅速放入燃烧瓶中，按紧瓶塞，用少量水封闭瓶口，进行有机破坏，燃烧完毕后 应无黑色碎片，强力振摇 第3页/共8页 5分钟，使生成的烟雾完全吸入吸收液中。 B.吸取制备的供试液2ml，加茜素氟蓝试液0.5ml，再加12%醋酸钠的稀酸溶液0.2ml，用 水稀释至4ml，加硝酸亚铈试液0.5ml，即显蓝紫色，同时做空白对照试液。 4.4溶液的澄清度（供注射用） 4.4.1检验操作 取本品20mg加水10ml使溶解，溶液应澄清；如显混浊，与1号浊度标准液（中国药典 2000年版二部附录Ⅸ B）比较。 4.4.2结果判断 溶液应澄清或不得超过1号浊度标准液。 4.5有机氟含量测定 4.5.1供试品制备 取本品约15mg，精密称定，研细，置无灰滤纸中心，按药典规定的方法进行折叠后，固 定于铂丝下端内或螺旋处，使尾部露出，在燃烧瓶内加入20ml水为吸收液，并将瓶颈用 水湿润，小心急速通入氧气约1分钟（通气管应接近液面，使瓶内空气排尽），立即用表 面皿覆盖瓶口，移置他处，点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放入燃烧瓶中，按紧瓶塞 ，用少量水封闭瓶口，进行有机破坏，燃烧完毕后应无黑色碎片，强力振摇5分钟，使生 成的烟雾完全吸入吸收液中，放置15分钟，振摇2- 3分钟，用少量水冲洗瓶塞及铂丝，合并洗液及吸收液，置100ml量瓶中，加水稀释至刻 度，摇匀，即得。 4.5.2氟对照溶液的制备 精密称取经105℃干燥1小时的氟化钠22.1mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度 ，摇匀，精密量取20ml，置另一100ml量瓶中，加水稀释至刻度，即得（每1ml相当于20 μg的F）。 4.5.3检验操作 4.5.3.1精密量取对照溶液与供试品溶液各2ml，分别置50ml量瓶中，各加茜素氟蓝试液 10ml，摇匀，再加12%醋酸钠的稀酸溶液3.0ml与硝酸亚铈试液10ml，加水稀释至刻度， 摇匀，在暗处放置1小时。 4.5.3.2空白校正 不加供试品，按4.5.4.1操作，样品测试前校正比色皿。 4.5.3.3取样品溶液与对照品溶液分别在610nm的波长处测定吸收度。 4.5.4计算 As Cs = —————×Cr Ar 第4页/共8页 式中 Cs —— 供试品溶液的浓度； As —— 供试品溶液的吸收度； Cr —— 对照品溶液的浓度； Ar —— 对照品溶液的吸收度。 4.5.5结果判定 含氟量应为11.1%～12.4%。 4.6有关物质 4.6.1试剂及配制 4.6.1.1 0.1mol/L氢氧化钠试剂 取澄清的氢氧化钠饱和液5.6ml，加新沸过的冷水1000ml，摇匀，即得。 4.6.1.2 PH7.0磷酸盐缓冲液 取磷酸二氢钾6.8g，加水适量使溶解，加0.1mol/L氢氧化钠液291ml，摇匀，即得。 4.6.2供试品制备 取本品加流动相制成每1ml中含1mg的溶液（1）和每1ml中含0.01mg的溶液（2）。 4.6.3仪器操作 取溶液（2）20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分的峰高约达记录仪满 量程的20%，再取溶液（1）20μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主成份峰保留时间的2倍 。 4.6.4结果判定 各杂质峰面积之和不得大于溶液（2）色谱图上的主峰面积。 4.7含氯化合物 4.7.1试剂及配制 4.7.1.1 0.4%氢氧化钠液 取氢氧化钠0.4g，加新沸过放冷的水至100ml，即得。 4.7.1.2稀硝酸溶液（本品含稀硝酸在9.5%-10.5%） 取硝酸105ml，加水稀释至1000ml，即得。 4.7.1.3标准氯化钠溶液的制备 精密称取氯化钠0.165g，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀， 作为贮备液。 临用前精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每 1ml相当于10μg的Cl）。 4.7.2检验操作 第5页/共8页 4.7.2.1精密称取本品约20mg，研细，按本规程中4.5.1项下操作，用0.4%氢氧化钠溶液 20ml为吸收液，同法作空白试验，俟吸收完全后，强力振摇5分钟，加稀硝酸10ml，溶液 如不澄清应过滤，移至50ml纳氏比色管中，加水使成40ml，摇匀，即得供试品。 4.7.2.2对照溶液 精密吸取标准氯化钠溶液6.0ml于无灰滤纸中，按上述样品溶液制备方法操作，制得 对照溶液。 4.7.2.3结果判定 样品与对照比较，样品管颜色不得深于对照管(0.3%)。 4.8炽灼残渣 4.8.1坩埚恒重 取坩埚在500-600℃马弗炉中干燥至恒重。 4.8.2样品检测 取本品1g，置已炽灼至恒重并精密称重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化， 放冷至室温，加硫酸约1ml，使湿润，低温加热至硫酸蒸汽除尽后，在500- 600℃炽灼使完全灰化，缓缓降温，并移置干燥器内，放至室温，精密称定后，再在500- 600℃炽灼至恒重，即得。 4.8.3结果判定 遗留残渣不得超过0.1%。 4.9重金属 4.9.1试剂及配制 4.9.1.1标准铅溶液的配制 称取硝酸铅0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml，与水50ml溶解后，用水稀释至刻 度，摇匀，作为贮备液。 临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1m l相当于10ug的Pb）。 注意：配制与贮存用的玻璃容器均不得含铅。 4.9.1.2醋酸盐缓冲溶液(PH3.5) 取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加盐酸液(7mol/L)38ml，用盐酸液(2mol/L)或氨试 液(5mol/L)准确调节PH值至3.5（电位法指示），用水稀释至100ml即得。 4.9.1.3 7mol/L盐酸 取630ml盐酸加水适量，使成1000ml，摇匀，即得。 4.9.1.4 2mol/L盐酸 第6页/共8页 取盐酸180ml，加水适量使成1000ml，摇匀，即得。 4.9.1.5硫代乙酰胺试液 取硫代乙酰胺4g，加水溶解成100ml，置冰箱中保存。临用前取混合液[由氢氧化钠液 （1mol/L）15ml，水5.0ml及甘油20ml组成]5.0ml，加4%硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴 上加热20秒钟，冷却，立即使用。 4.9.1.6 1mol/L氢氧化钠溶液 取澄清的氢氧化钠饱和液56ml，加新沸过的冷水使成1000ml，摇匀，即得。 4.9.1.7酚酞指示剂 取酚酞1g，加乙醇100ml使溶解，即得。 4.9.2检验操作 取炽灼残渣项下遗留的残渣加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸汽除尽后，放冷，加盐 酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨试液至使酚酞指示剂显中性，再加醋酸盐缓冲 溶液（PH3.5）2ml，微热溶解后，移置25ml纳氏比色管中，加水稀释成25ml，另取硝酸 0.5ml，盐酸2ml置瓷蒸发皿中蒸干后再加醋酸盐缓冲溶液(PH3.5)2ml与水15ml微热溶解 后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液2.0ml，再用水稀释成25ml，并在两管中分别加硫 代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，样品管中显出的 颜色与对照管相比较，不得更深。 4.9.3结果判定 含重金属不得超过百万分之二十。 4.10干燥失重 4.10.1取扁形称量瓶2个，置电热干燥箱内105℃，干燥至恒重，取出放置装有干燥剂的干 燥器内约30分钟，精密称定，加入约1g样品，其厚度不超过5mm，精密称定，放入105℃干 燥箱内，瓶盖半开或置瓶旁，干燥至恒重，取出后迅速盖好盖子，放入干燥器内约30分 钟，精密称定。 4.10.2计算 M1 –M2 干燥失重 = ———— ×100% M 式中： M1 ——样品加恒重的空称量瓶重g； M2 ——干燥恒重后的样品加称量瓶重g； M ——样品重量g。 4.10.3结果判定 减失重量不得超过0.5%。 第7页/共8页 4.11含量测定 4.11.1高氯酸滴定液（0.1mol/L）的配制 取无水冰醋酸（按含水量计算，每1g水加醋酐5.22ml）750ml加入高氯酸（70- 75%）85ml，摇匀，在室温下缓缓滴加醋酐23ml，边加边摇，待加完后再振摇均匀，放冷 ，加无水冰醋酸适量使成1000ml，摇匀，放置24小时。 4.11.2标定 取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.16g，精密称定，加无水冰醋酸20ml 使溶解，加结晶紫指示液1滴，用本液缓缓滴定至蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正 。每1ml的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于20.42mg的邻苯二甲酸氢钾。 4.11.3计算 M×1000 F = ————————— （V-V0）×20.42 式中 M —— 称取基准物重量g； V —— 消耗高氯酸滴定液(0.1mol/L)毫升数ml； V0 ——空白试验消耗高氯酸滴定液(0.1mol/L)毫升数ml。 20.42 — 滴定度。 4.11.4注意事项 标定在正常情况下不得少于三份，复标份数也不得少于3份，标定和复标的相对偏差均不 得超过0.1%，计算二者的相对偏差不得超过0.15%，否则重标。 4.11.5测定操作 取本品约0.1g，精密称定，加冰醋酸50ml溶解后，用高氯酸淮滴定。照电位滴定法( 中国药典2000年版二部附录Ⅶ A),用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正,每1ml的高氯酸滴 定液(0.1mol/L)相当于15.31mg的C13H12F2N6O。 4.11.6计算 参考电位滴定二级微商法 4.11.6.1利用比例法求出等当点时滴加滴定液毫升数。 4.11.6.2 V×F×15.31 供试品含量 = ——————— ×100% Ms×1000 式中 V —— 消耗滴定液毫升数； F —— 滴定液浓度因子； 15.31— 滴定度； 第8页/共8页 Ms —— 样品称重量。 4.11.7结果判定： 按干燥品计算，含C13H12F2N6O不得少于99.0%(供注射用)；或98.5%(供口服用)。 4.12细菌内毒素（供注射用） 取本品0.10g,用无菌生理盐水配成100ml:0.1g的氟康唑溶液,115℃灭菌30分钟,取灭菌 后的溶液,照细菌内毒素检查操作规程操作,每1ml溶液中含内毒素应小于0.5EU。 5 培训 5.1培训对象：化验员。 5.2培训时间：一小时。
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